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domingo, 25 de julio de 2021

Ejemplo de ADN recombinante en la naturaleza y de ADN recombinante artificial - Microtia

ADN recombinante en la naturaleza

El neumococo (Streptococcus pneumoniae) toma ADN de su entorno y es "transformado" por recombinación ya que toma material genético de un trasfondo y lo inserta en sí mismo. Se da por tres mecanismos: transformación, conjugación y transducción. La absorción de ADN del medio ambiente por transformación se asocia con la recombinación homóloga.


 ADN recombinante artificial en la Microtia

La microtia dependiendo del grado puede afectar al oído interno, en ese caso se usa terapia génica para restaurar la función auditiva.

Los principales instrumentos de edición de genes son enzimas diseñadas a base de nucleasas: Cre-recombinasa y Cas9 que introducen ADN monocatenario o bicatenario, que estimulan la maquinaria de reparación del ADN innato. Se da través de dos técnicas: unión de extremos no homólogos (NHEJ) o reparación dirigida por homología (HDR).

Tema: Terapias genéticas emergentes en la pérdida auditiva

Objetivos: Desarrollo de intervenciones terapéuticas apropiadas que se dirijan a los diversos tipos de células por perdida auditiva.

Gen o secuencia a clonar: se han dirigido a Vglut3, Tmc1 , Whirlin , Ush1-c , Clarin-1 y GJB2.

Enzimas de restricción: Cas9 y Cpf1

Enzima ligasa: Enzima ligasa de ADN T4

Vector: AAV (virus adenoasociado), AdV2 y AdV5 (adenovirus), Lentivirus (retrovirus).

Célula receptora: células eucariotas: de Corti, células de Hensen, células gliales.

MTG (Mecanismo de transferencia o inserción del gen): transfección de ADN mediada por campos eléctricos (electroporación)

MIC (Métodos de identificación de clones): Secuenciación de ADN


Referencia Bibliográfica:

viernes, 16 de julio de 2021

Técnica con Microarray en la expresión de genes de la Artritis reumatoide

Se extrajo el ARN total de células de sangre periférica de los pacientes. Se utilizaron microarrays de genoma completo CodeLink y cada individuo se midió en duplicado. Los genes significativamente expresados se seleccionaron a través de SAM (Significative Analysis of Microarray). Posteriormete el agrupamiento de estos genes se llevó a cabo de acuerdo a su similitud GO (Gene Ontology). Resultados: 25 genes implicados en autoinmunidad y respuesta inflamatoria se encontraron diferencialmente expresados, sub y sobre-expresados en pacientes de AR




sábado, 10 de julio de 2021

Prueba PCR en pacientes con Artritis Reumatoide

Tema: Comprensión actual de un papel emergente del gen HLA-DRB1 en la artritis reumatoide

Objetivo: Identificar el gen HLA-DRB1 e indicar su importancia en la morbilidad de la AR

Muestra biológica: Sangre (Linfocitos T)

Tipo de Ácido nucleico: ADN genómico

Gen o secuencia a amplificar: HLA-DRB1

Tipo de PCR: PCR estándar y NGS

Visualización: Lectura en software, alineando las lecturas de secuencia con los alelos registrados en la base de datos.

La presencia de los alelos HLA-DRB1*04 y HLA-DRB1*09 está relacionada con la susceptibilidad de presentar AR en los pacientes.


PCR y NGS



sábado, 3 de julio de 2021

Alteraciones de la Epigenómica en la Artritis reumatoide

Las alteraciones de la epigenómica contribuyen a conocer la patogenia de la artritis reumatoide (AR) modificando el ADN y las histonas. El epigenoma está formado de compuestos químicos y proteínas que se unen al ADN y dirigen acciones como la activación o desactivación de genes. Los reguladores clave de la AR incluyen la metilación del ADN por secuenciación de bisulfito de genoma completo, perfiles de miARN, variaciones genéticas por secuenciación de exoma completo y perfiles de ARNm de sinoviocitos. Además, modificaciones de histonas (H3K27ac, H3K4me1, H3K4me3, H3K36me3, H3K27me3 y H3K9me3)




REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29765031/

2. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30820026/

3. Imagen: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5953939/figure/Fig1/

viernes, 25 de junio de 2021

Alteración de la Traducción en la Artritis Reumatoide

En la actualidad, se ha descubierto una clase de reguladores postranscripcionales que inhiben la traducción o producen la degradación del ARN mensajero. Son los llamados microARN (miARN). El miARN-155 regula las células inmunitarias. Se han encontrado estudios que demuestran que la expresión de miR-155 estaba elevada en pacientes con Artritis reumatoide. Por esta razón se han propuesto como biomarcadores de diagnóstico, pronóstico de esta enfermedad.




domingo, 20 de junio de 2021

Alteraciones de la Transcripción en Artritis Reumatoide

La destrucción articular ocurre en vías dependientes del control del sistema inmune como genes que codifican citocinas:

En la Artritis Reumatoide existe una mayor cantidad de las citocinas que son segregadas por células Th-1 y células proinflamatorias, y aumento en la expresión de algunos factores que intervienen en los procesos de transcripción genética de las mismas. En las células, la activación del p53 previene la activación de otros factores de transcripción y, por consiguiente, de las ciclinas D y E, induciendo a la interrupción del ciclo celular. 

 

Referencias bibliográficas:

  1. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28192374/
  2. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28291534/
  3. Imagen: http://www.revcocmed.sld.cu/index.php/cocmed/article/view/3447/1778



sábado, 12 de junio de 2021

Alteraciones de la genómica en Artritis Reumatoidea

En la Artritis Reumatoide influyen factores de riesgo ambientales y genéticos. La relación genética con esta enfermedad se da debido a un gen del sistema inmunitario llamado HLA-DR4. Actualmente, se han encontrado alrededor de 100 loci (lugar especifico del cromosoma donde se encuentra el gen) asociados con la actividad y la respuesta al tratamiento de la Artritis Reumatoide.
Se han realizado estudios que demuestran que el 12% al 15% de gemelos padecen ambos AR, mientras que en mellizos solo el 4%.  Los últimos estudios muestran que hay una relación entre el cigarrillo y el gen DR4, el cual aumenta el riesgo de padecer AR.

                                                                       

Referencias bibliográficas:

sábado, 5 de junio de 2021

Artritis Reumatoidea

Es una enfermedad crónica y autoinmunitaria en la que se da una inflamación del revestimiento de las articulaciones y puede afectar a otros órganos ya que el sistema inmunológico ataca a sus propios tejidos. Su causa es desconocida y afecta en mayor proporción a adultos mayores y personas de mediana edad, especialmente mujeres. Se presenta con la pérdida de la función de las articulaciones, inflamación, dolor y rigidez. En Ecuador tiene una prevalencia del 0,9%.


Referencia Bibliográfica: 

miércoles, 2 de junio de 2021

Bienvenido/a a mi blog

  ‘‘Todos quieren poseer conocimientos, pero pocos están dispuestos a pagar el precio’’ 

                                                                                                                           - Juvenal 

💜Hola, mi nombre es Lady Herrera y te doy la bienvenida a mi blog. Este es un espacio de investigación científica en el que podrás encontrar temas de interés médico actualizados y toda esta información será explicada de una mejor manera mediante imágenes descriptivas, videos educativos, gifs explicativos y otros componentes creativos para poder comprender mejor los temas que se van a tratar. 💜

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